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Saggio immunoenzimatico sensibile per antigeni core del virus dell’epatite B e loro correlazione con la carica virale.

Posted on Giugno 15, 2022Giugno 18, 2022 by Andrea
  1. È stato sviluppato un test immunoenzimatico sensibile (EIA) specifico per   l’ antigene  core   dell’epatite B  ( HBcAg  ) e   l’ antigene  del virus dell’epatite B (HBeAg).  Abbiamo etichettato i prodotti del gene  pre  – core  /  core come antigeni core del virus  dell’epatite B (  HBV  )  ( HBcrAg   ). Al fine di rilevare l’HBcrAg anche nei campioni contenenti anticorpi anti-HBc/e, i campioni sono stati pretrattati con detergenti.
  2. Gli anticorpi vengono inattivati ​​da questo pretrattamento e allo stesso tempo gli   antigeni   vengono rilasciati e gli epitopi vengono esposti. Il test ha mostrato un recupero dal 71 al 112% utilizzando sieri HBcrAg-positivi. Non abbiamo osservato alcuna interferenza da parte degli anticoagulanti o dei componenti del sangue testati. Quando il cut-off è stato inizialmente fissato a 10 (3) U/ml, tutti i sieri di controllo sani (HBsAg/  HBV  – DNA negativo; n = 108) e gli anticorpi anti-HCV positivi (n = 59) sono stati identificati come negativi. Il test ha mostrato un limite di rilevamento di 4 x 10 (2) U/ml utilizzando l’   antigene ricombinante    .
  3. I limiti di rilevamento sono stati confrontati in quattro  sieri HBV   ad alto titolo diluiti in serie. Il test HBcrAg ha mostrato una sensibilità maggiore rispetto  all’amplificazione mediata dalla trascrizione (TMA) dell’HBV -DNA  o al test radioimmunologico (RIA) HBeAg nel test di diluizione. I livelli di HBcrAg erano ben correlati con   l’HBV  -DNA TMA (r = 0,91, n = 29) e il rilevamento interno della PCR in tempo reale (r = 0,93, n = 47) nei pazienti con epatite B.
  4. Nei pannelli di sieroconversione HBeAg/anti-HBe, la concentrazione di HBcrAg variava in linea con  i livelli di HBV -DNA  . La concentrazione di HBcrAg riflette la   carica virale dell’HBV equivalente al livello di HBV-DNA  ,  quindi il test offre un metodo semplice per monitorare l’epatite B.
  5. Studio clinico di fase I in adulti sani di un candidato per il vaccino intranasale contenente   antigeni di   superficie e   core   dell’epatite B ricombinante  .
  6. Il candidato vaccino intranasale (NASVAC) contenente  gli antigeni di  superficie (HBsAg) e   core   (  HBcAg) del virus dell’epatite B (  HBV  ) ha dimostrato di essere altamente immunogenico nei modelli animali. 
  7. Lo studio clinico di Fase I, randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo è stato condotto su 19 maschi adulti sani senza marcatori sierologici di immunità/   infezione da HBV  . Questo studio è stato progettato per studiare la sicurezza e il profilo immunogenico della co-somministrazione nasale di entrambi gli   antigeni  ricombinanti dell’HBV  . Lo studio è stato condotto secondo le linee guida della Buona pratica clinica.
  8. I partecipanti avevano un’età compresa tra 18 e 45 anni e sono stati randomizzati a ricevere una miscela di 50 μg di HBsAg e 50 μg   di HBcAg   o soluzione salina allo 0,9% come placebo come spray nasale a cinque dosi a 0, 7, 15, 30 e 60 giorni. Un volume totale di 0,5 ml è stato somministrato in due dosi da 125 microli per narice. Gli eventi avversi sono stati registrati attivamente 1 ora, 6 ore, 12 ore, 24 ore, 48 ore, 72 ore, 7 giorni e 30 giorni dopo ciascuna dose. I titoli anti-HBs e anti-HBc sono stati valutati utilizzando gli appropriati kit ELISA nei giorni 30 e 90.
  9. Il candidato al vaccino era sicuro e ben tollerato. Le reazioni avverse includevano starnuti (34,1%), naso che cola (12,2%), naso chiuso (9,8%), prurito al palato (9,8%), mal di testa (9,8%) e malessere generale, benessere (7,3%). Tutte queste reazioni erano autolimitanti e di lieve intensità. Durante lo studio non sono stati registrati eventi gravi o imprevisti. Il vaccino ha indotto una sieroconversione anti-HBc nel 100% dei soggetti già al giorno 30  del programma vaccinale, mentre il titolo sieroprotettivo anti-HBs >> o = 10 UI/L) ha raggiunto il picco al giorno 90 (75%). Tutti i soggetti nel gruppo placebo sono rimasti sieronegativi per tutto lo studio.
  10. Il candidato al vaccino HBsAg  HBcAg   è risultato sicuro, ben tollerato e immunogeno in questo studio di Fase I su adulti sani. A nostra conoscenza, questa è la prima dimostrazione della sicurezza e dell’immunogenicità di un potenziale   vaccino  nasale contenente HBV   .

Il nucleo del virus dell’epatite B e gli antigeni e inducono diversi sottoinsiemi di cellule Th: la struttura dell’antigene può influenzare il fenotipo delle cellule Th.

  1. La secrezione  dell’antigene e del  virus dell’epatite B (  HBV  ) (HBeAg) è stata preservata durante l’evoluzione degli epadnavirus. Tuttavia, la funzione di questa forma virale secreta dalla nucleoproteina rimane enigmatica. È stato suggerito che HBeAg agisca come un immunomodulatore.
  2. Abbiamo quindi esplorato la possibilità che le due forme strutturali della nucleoproteina virale,   il nucleo  molecolare dell’HBV    (  HBcAg  ) e l’ HBeAg non particellare, possano indurre preferenzialmente diversi sottoinsiemi di linfociti T helper (Th).
  3. Per questo, i topi sono stati immunizzati   con HBcAg e HBeAg ricombinanti     in presenza e assenza di adiuvanti e sono stati determinati i profili isotipici dell’immunoglobulina G (IgG) di anti-HBc e anti-HBe. In secondo luogo, è stata misurata la produzione di citochine in vitro da parte delle cellule Th stimolate da  HBcAg  e HBeAg.
  4. L’immunogenicità   di HBcAg  , a differenza di HBeAg, non ha richiesto l’uso di adiuvanti. Inoltre,   HBcAg   ha indotto principalmente anticorpi anti-HBc IgG2a e IgG2b, con bassi livelli di IgG3 e nessun anti-HBc IgG1.
  5. Al contrario, la risposta anticorpale anti-HBe era dominata dall’isotipo IgG1; basso livello di anticorpi IgG2a o IgG2b anti-HBe e nessun anticorpo IgG3 anti-HBe. La produzione di citochine da parte delle cellule Th stimolate da  HBcAg  e HBeAg era coerente con i profili isotipici delle IgG. Le cellule Th stimolate con HBcAg hanno  prodotto in modo efficiente interleuchina-2 (IL-2) e interferone gamma (IFN-gamma) e bassi livelli di IL-4. Al contrario, l’immunizzazione con HBeAg ha indotto una produzione efficiente di IL-4 e quantità inferiori di IFN-gamma.
  6. I risultati indicano che   HBcAg   induce preferenzialmente, ma non esclusivamente, cellule simili a Th1  e che HBeAg in modo preferenziale, ma non esclusivo, induce cellule simili a Th0 o Th2. Poiché   HBcAg   e HBeAg reagiscono in modo incrociato con il riconoscimento delle cellule Th, questi risultati mostrano che le cellule Th con la stessa specificità possono evolvere in diversi sottoinsiemi Th in base alla forma strutturale dell’immunogeno.
  7. Questi risultati possono essere importanti per l’infezione cronica da  HBV   . L’HBeAg circolante può indebolire i meccanismi di eliminazione dei farmaci antivirali inducendo la produzione antinfiammatoria di citochine Th2-simili. Infine, l’effetto della  struttura dell’antigene   sul fenotipo dei linfociti Th non era assoluto e poteva essere modulato dal trattamento in vivo con citochine. Ad esempio, il trattamento con IFN-alfa ha inibito la produzione di anticorpi Th2 specifici per HBeAg e ha modificato il profilo isotipico delle IgG anti-HBe verso il fenotipo Th1.

La stimolazione di una risposta citotossica dei linfociti T all’antigene esogeno del   nucleo  del   virus dell’epatite B dipende dai linfociti B.

L’ antigene  principale del  virus dell’epatite B (  HBV )   (  HBcAg )  ha la capacità unica di legare ad alta frequenza i linfociti B umani e murini naive. Il ruolo delle   cellule B ingenue che legano l’  HBcAg nell’immunogenicità dell’HBcAg   non è chiaro. Le proprietà di legame dell’HBcAg dei   linfociti B naive sono state caratterizzate utilizzando  particelle di HBcAg  con sequenze di regioni di spike mutate (residui 76-85).

L’eliminazione dei residui 76-85 (HBcDelta76-85) ha interrotto il legame ingenuo delle cellule B, mentre l’eliminazione dei residui 79-85 no. Le molecole di HBcAg   con Ile invece di Ala naturale in posizione 80 non si legavano ai linfociti B ingenui, mentre l’inversione di Ile80 – >> Ala ripristinava il legame dei linfociti B.

L’interruzione della capacità   di HBcAg  di legare i linfociti B ha avuto un effetto marginale sull’immunogenicità complessiva dei linfociti B in varie particelle, suggerendo che erano ugualmente efficaci nello stimolare i linfociti T helper. Pertanto, è allo studio il ruolo delle   cellule B che legano HBcAg  nella stimolazione delle cellule T citotossiche specifiche (CTL) HBcAg  .

HBcAg (HBV) (18 - 27)

5-01267 CHI Scientific 4 x 5mg Ask for price

Recombinant HBV Core Protein

VAng-Lsx04579-1mg Creative Biolabs 1 mg 2236 EUR

QuickTiter HBV Core Antigen ELISA Kit

VPK-150 Cell Biolabs 96 assays 914 EUR

QuickTiter HBV Core Antigen ELISA Kit

VPK-150-5 Cell Biolabs 5 x 96 assays 3756 EUR

Hepatitis B Core Antigen (HBcAg) Antibody (HRP)

abx411397-01mg Abbexa 0.1 mg 509 EUR

Virus Hepatitis B Core Antigen (HBcAg) Protein

abx670097-01mg Abbexa 0.1 mg 690 EUR

Virus Hepatitis B Core Antigen (HBcAg) Protein

abx670098-01mg Abbexa 0.1 mg 565 EUR

Virus Hepatitis B Core Antigen (HBcAg) Protein

abx670100-01mg Abbexa 0.1 mg 565 EUR

HBcAg (HBV) (18 27) Peptide

20-abx266153 Abbexa
  • 439.00 EUR
  • 565.00 EUR
  • 328.00 EUR
  • 10 mg
  • 25 mg
  • 5 mg

HBV Core Antibody

20-abx137186 Abbexa
  • 885.00 EUR
  • 342.00 EUR
  • 1609.00 EUR
  • 0.5 mg
  • 100 ug
  • 1 mg

HBV Core Antigen (aa 1 - 186) [His]

DAG1452 Creative Diagnostics 100 µg 645 EUR

Rat Hepatitis B Core Antigen (HbcAg) ELISA Kit

abx055691-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

anti-HBcAg core IgG2a

036-A-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

anti-HBcAg core IgG2a

036-A-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

Recombinant HBcAg antigen, HRP-conjugated

DAG4623 Creative Diagnostics 1mg 858 EUR

HBV core (107 - 115)

5-01268 CHI Scientific 4 x 5mg Ask for price

HBV surface recombinant antigen HBsAg antigen

00123-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HBV surface recombinant antigen HBsAg antigen

00123-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HBV surface recombinant antigen HBsAg antigen

00124-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HBV surface recombinant antigen HBsAg antigen

00124-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

Virus Hepatitis B Virus 320 Core Antigen (HBV 320 Core Ag) Protein

abx670003-50ug Abbexa 50 ug 411 EUR

Recombinant Hepatitis B core antigen (HBcAg) protein (aa: 1-144, His Tag)

HBC15-R-10 Alpha Diagnostics 100 ug 347 EUR

Mouse Monoclonal Anti-Hepatitis B Virus core antigen (HBcAg) IgG

HBVC11-M Alpha Diagnostics 100 ul 482 EUR

HBV Core Antigen (aa 1 - 149)(subtype ayr ) [His]

DAG2293 Creative Diagnostics 100 µg 724 EUR

HBV surface recombinant antigen HBsAg

00122-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HBV surface recombinant antigen HBsAg

00122-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HbcAg - Hepatitis B Virus Core; Polyclonal

A00060 ScyTek Laboratories 6 ml 108 EUR

HbcAg - Hepatitis B Virus Core; Polyclonal

A00060.0025 ScyTek Laboratories 25 ml 252 EUR

HbcAg - Hepatitis B Virus Core; Polyclonal

A20060 ScyTek Laboratories 2 ml 79 EUR

HBV core protein (128-140)

5-01270 CHI Scientific 4 x 1mg Ask for price

HBV core (107 115) Peptide

20-abx266079 Abbexa
  • 411.00 EUR
  • 662.00 EUR
  • 314.00 EUR
  • 10 mg
  • 25 mg
  • 5 mg

HCV core recombinant antigen

00115-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core recombinant antigen

00115-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HCV core recombinant antigen

00152-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core recombinant antigen

00152-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

Recombinant HCV Core Antigen

VAng-Lsx04584-1mg Creative Biolabs 1 mg 1686 EUR

Mouse Monoclonal anti-Hepatitis B core antigen (HBcAg) Clone#1 capture

HBC11-M Alpha Diagnostics 100 ug 457 EUR

Mouse Monoclonal anti-Hepatitis B core antigen (HBcAg) Clone #2 detection

HBC12-M Alpha Diagnostics 100 ug 457 EUR

Recombinant HBV Core Protein (aa 1-186) [His]

VAng-Lsx0176-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

Recombinant (E.coli) Hepatitis B Virus core antigen (HBcAg) (1-144 aa, 17 kda, >95%)

HBVC11-R-100 Alpha Diagnostics 100 ug 286 EUR

Recombinant (E. coli) Hepatitis B Virus core antigen (HBcAg) (1-183aa, 18 kda, >95%)

HBVC15-R-25 Alpha Diagnostics 25 ug 225 EUR

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype ay)

VAng-Wyb8577-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

HCV core recombinant antigen, Rhodamine

00115-V-R-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core recombinant antigen, Rhodamine

00115-V-R-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HBV antigen HBsAg Antibody

abx140205-01mg Abbexa 0.1 mg 328 EUR

HBV antigen HBsAg Antibody

abx140206-01mg Abbexa 0.1 mg 328 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core Protein, Untagged, E.coli-100ug

QP12130-100ug EnQuireBio 100ug 218 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core Protein, Untagged, E.coli-1mg

QP12130-1mg EnQuireBio 1mg 1261 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core Protein, Untagged, E.coli-500ug

QP12130-500ug EnQuireBio 500ug 663 EUR

Recombinant HBV e Antigen (aa 1-160)

VAng-0502Lsx-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype adw) (Yeast)

VAng-Wyb8578-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype adr) (Yeast)

VAng-Wyb8580-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

Recombinant Feline Immunodeficiency Virus Core Antigen

DAG552 Creative Diagnostics 100ug 949 EUR

Hepatitis C virus core recombinant antigen

8802 Virostat 100 ug 398 EUR

Hepatitis B virus core recombinant antigen

8914 Virostat 100 ug 561.13 EUR

Hepatitis C virus core recombinant antigen

8924 Virostat 100 ug 343.63 EUR

Hepatitis B virus core recombinant antigen

8927 Virostat 100 ug 343.63 EUR

Hepatitis B virus core recombinant antigen

8929 Virostat 100 ug 398 EUR

Feline Immunodef. virus core recombinant antigen

8963 Virostat 100 ug 561.13 EUR

HCV core recombinant antigen, Biotin conjugate

00115-V-B-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core recombinant antigen, Biotin conjugate

00115-V-B-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HCV core recombinant antigen, FITC conjugate

00115-V-F-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core recombinant antigen, FITC conjugate

00115-V-F-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HCV core 2-119aa recombinant antigen

00150-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HCV core 2-119aa recombinant antigen

00150-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HIV 1 p24 core recombinant antigen

00177-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HIV 1 p24 core recombinant antigen

00177-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HTLV-I p24 core recombinant antigen

00204-V-01mg Virogen 0,1 mg 267.5 EUR

HTLV-I p24 core recombinant antigen

00204-V-1000ug Virogen 1000 ug 1282.5 EUR

HBV Surface Antigen (Subtype ay)

VAng-0496Lsx-1mg Creative Biolabs 1 mg 1594 EUR

Recombinant HBV Core Protein (aa 1-149) (Subtype ayr) [His]

VAng-Lsx0179-100g Creative Biolabs 100 µg 594 EUR

Recombinant HBV Core Protein (aa 1-149) (Subtype ayr) [His]

VAng-Lsx0179-1mg Creative Biolabs 1 mg 3069 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core delta Protein, Untagged, E.coli-100ug

QP12131-100ug EnQuireBio 100ug 218 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core delta Protein, Untagged, E.coli-1mg

QP12131-1mg EnQuireBio 1mg 1261 EUR

Recombinant Hepatitis B HBV core delta Protein, Untagged, E.coli-500ug

QP12131-500ug EnQuireBio 500ug 663 EUR

Rabbit Anti-Hepatitis B core protein (anti-HBcAg) antiserum

HBC11-S Alpha Diagnostics 100 ul 457 EUR

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype ad) (Saccharomyces cerevisiae)

VAng-0497Lsx-100g Creative Biolabs 100 µg 1206 EUR

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype adr) (CHO Cells)

VAng-0498Lsx-500g Creative Biolabs 500 µg 3349 EUR

Recombinant HBV Surface Antigen (Subtype ayw) (S Region)

VAng-0499Lsx-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price

Recombinant HBV e Antigen [GST] (1 mg/mL)

VAng-0503Lsx-inquire Creative Biolabs inquire Ask for price
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Il ruolo delle cellule B leganti HBcAg nella   stimolazione dei CTL specifici  per HBcAg  è stato valutato mediante immunizzazione con   HBcAg endogeno   (immunizzazione del DNA) e con      particelle  esogene ricombinanti di HBcAg .

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