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Quanto sono affidabili i kit ELISA Glypican4 disponibili in commercio?

Posted on Dicembre 31, 2021 by Andrea
Obiettivo: Glypican4 è una nuova interessante adipochina, che sembra svolgere un ruolo importante nei processi di sviluppo ed è potenzialmente associata a cambiamenti metabolici nell’obesità e nel diabete mellito di tipo 2. Attualmente, solo pochi studi hanno esaminato glipican4 nel sangue umano, principalmente negli adulti.
Design, pazienti e misurazioni: Lo scopo del nostro studio era di indagare i livelli sierici di glypican4 in bambini e adolescenti magri, sovrappeso e obesi, per svelare una possibile associazione tra siero di glypican4 livelli e parametri di obesità e insulino-resistenza. Al fine di determinare un metodo adatto per indagare i livelli sierici di glypican4, abbiamo convalidato due kit ELISA di glypican4 umano disponibili in commercio, utilizzando campioni di siero e plasma di un paziente obeso, insulino-resistente e di un soggetto di controllo sano, un frammento di proteina glipican4 umano ricombinante e lisato cellulare con sovraespressione di glypican4.
Risultati: Utilizzando il kit ELISA n. 1 non siamo stati in grado di rilevare valori al di sopra del livello di fondo, a parte i valori della curva standard. Il kit ELISA n. 2 inizialmente sembrava adatto per misurare glypican4, ma ulteriori esperimenti di validazione hanno mostrato non linearità delle diluizioni seriali, nessun riconoscimento di un frammento di proteina ricombinante umano glypican4 e non linearità nel recupero del lisato cellulare con sovraespressione di glypican4. Inoltre, si è verificata una notevole diminuzione (circa il 68%) dei valori misurati tra due esperimenti, eseguiti in momenti diversi con aliquote dello stesso campione di siero. Al contrario, ulteriori esperimenti hanno riscontrato che la stabilità del campione non era compromessa.
Conclusioni: Un’ampia valutazione delle prestazioni di due kit ELISA disponibili in commercio ha portato alla conclusione che nessuno di essi è applicabile per la misurazione del glipicano4 nei campioni di sangue umano.

Valutazione di tre kit ELISA disponibili in commercio per la determinazione della cromogranina A

La cromogranina A (CgA) è attualmente il biomarcatore tumorale più prezioso per il lavoro diagnostico, la gestione e il follow-up dei tumori neuroendocrini (NET). Lo scopo del nostro studio era confrontare tre diversi kit CgA ELISA disponibili in commercio e valutarne le prestazioni analitiche e cliniche. La CgA è stata misurata con tre diversi kit ELISA commerciali su sieri avanzati di 40 pazienti: Chromoa R assay (Cis), Hu chromogranin A ELISA (Dia) e Neolisa chromogranin A (Euro).

 

Le prestazioni analitiche e cliniche sono state valutate misurando la precisione, l’area sotto la curva ROC, la sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo e negativo, i coefficienti di correlazione e le analisi di regressione Passing e Bablok. La precisione (CV%) era accettabile per tutti gli ELISA valutati (Cis 10,3%; Dia 9,8%; Euro 14,5%). L’area sotto la curva (AUC) era comparabile tra i tre saggi (Cis 0,693; Dia 0,627; Euro 0,721). La sensibilità variava tra il 41,2% e il 64,7%.

La specificità variava tra il 69,6% e l’82,6%. Il confronto a coppie ha rivelato differenze sistematiche e proporzionali significative quando si confrontano Cis contro Dia (Cis = 25,30 + 1,94 Dia) e Euro contro Dia (Euro = 26,54 + 1,92 Dia). Le prestazioni analitiche e cliniche erano comparabili per i tre ELISA. I risultati CgA ottenuti con diversi ELISA non sono intercambiabili. Abbreviazioni CgA: Cromogranina A; ELISA: saggio di immunoassorbimento enzimatico; IRMA: saggio immunoradiometrico; NET: Tumori neuroendocrini; PPI: inibitori della pompa protonica; RIA: dosaggio radioimmunologico.

 

Sviluppo e applicazione di un kit ELISA per la rilevazione del progesterone del latte nelle vacche da latte

 

Il progesterone (P4) è un ormone gonadico steroideo prodotto principalmente dal corpo luteo e dalla placenta e ha varie funzioni biologiche, in particolare la regolazione riproduttiva. È importante stabilire un saggio immunoassorbente legato all’enzima P4 (ELISA) specifico e sensibile per lo studio dell’attività ovarica e dei disturbi riproduttivi. Pertanto, abbiamo preparato un anticorpo monoclonale (MAb) in un antigene completo (11α-OH-P4-HS-OVA). Sulla base del MAb e del nostro antigene completo precedentemente preparato, è stato sviluppato un ELISA altamente specifico e sensibile.
Nel presente studio è stato descritto un ELISA competitivo per la determinazione di P4 nel latte di vacca da latte. È stato riscontrato che la concentrazione di P4 nei campioni di latte di cinque vacche gravide era significativamente più alta di quella di cinque vacche in estro. Il tasso di diagnosi di gravidanza e non gravidanza in 54 vacche da latte era del 93,3% e del 95,8%, rispettivamente, da 19 a 23 giorni dopo la gravidanza rilevando la concentrazione di P4 nel latte. In sintesi, l’ELISA sviluppato è un potenziale strumento per la ricerca sulla P4 e offre una tecnica alternativa, semplice e rapida per rilevare la P4, in particolare nelle future grandi indagini cliniche sull’identificazione della gravidanza e sui disturbi riproduttivi negli allevamenti lattiero-caseari in Cina.

Valutazione delle prestazioni di kit ELISA commerciali per lo screening dei residui di furazolidone e furaltadone nei pesci.

Il monitoraggio normativo per i residui di farmaci nitrofurani nei prodotti dell’acquacoltura si è in gran parte concentrato su LC-MS/MS. Inoltre, sono necessari metodi di screening facili e ad alto rendimento per i programmi di monitoraggio. Abbiamo valutato le prestazioni dei kit ELISA Ridascreen (R-Biopharm) per i residui di farmaci nitrofurani nel muscolo di pesce, con verifica mediante LC-MS / MS.

I kit erano disponibili per le catene laterali 3-amino-2-ossazolidinone (AOZ) e 3-amino-5-morfolino-metil-2-ossazolidinone (AMOZ) di furazolidone e furaltadone, rispettivamente. Abbiamo trovato una buona ripetibilità in campioni di muscoli fortificati e sostenuti, con RSD che vanno dall’1,8% al 7,6%. I recuperi di AOZ e AMOZ da muscoli fortificati a livelli di 0,5-2 ng/g variavano dal 98% al 114%. È stata dimostrata un’eccellente selettività. I limiti minimi di rilevamento (MDL) per AOZ e AMOZ nel muscolo erano rispettivamente di 0,05 e 0,2 ng/g. I dati ELISA erano altamente correlati con quelli di LC-MS/MS. I risultati di questo studio supportano l’uso di questi kit come test di screening per i residui di nitrofurano nel muscolo del pesce.

Valutazione comparativa dei kit ELISA commerciali per il rilevamento dell’HIV in India.

SFONDO
L’India ospita la terza popolazione con infezione da HIV più alta a livello globale. L’ampiezza della sfida per il rilevamento dell’HIV è enorme. L’ELISA è la tecnica di screening più comunemente usata per l’HIV. C’è sempre un forte bisogno di kit ELISA di buona qualità. Tuttavia, i dati di valutazione della qualità sui kit indiani sono molto limitati rispetto ai kit riconosciuti a livello internazionale. Questo studio mirava a valutare le prestazioni e l’utilità diagnostica di cinque kit ELISA disponibili in commercio che sono frequentemente utilizzati in India.
RISULTATI
I kit ELISA valutati utilizzando un pannello interno di sieri di 100 membri ben caratterizzato hanno rivelato una sensibilità del 100% per tutti i lotti. Tuttavia, è stata osservata una variazione da lotto a lotto in termini di specificità, valore predittivo positivo (PPV) ed efficienza, sebbene non statisticamente significativa (p> 0,05). Per specificità, i kit di 3a generazione (media dal 99,6% al 99,3%) erano comparativamente migliori dei test di 4a generazione (dal 97,2% al 96,9%). Ma i kit di quarta generazione hanno ottenuto risultati molto migliori nella capacità di diagnosi precoce post infezione da HIV nel pannello di sieroconversione commerciale di 25 membri con un margine di almeno 22 giorni e fino a 35 giorni rispetto ai test di terza generazione.
CONCLUSIONI
I kit ELISA commerciali con una sensibilità del 100% sembrano appropriati per lo screening dell’HIV. La capacità di diagnosi precoce dopo l’infezione da HIV favorisce l’uso di kit di quarta generazione per garantire sangue libero da HIV per la trasfusione. Le variazioni da lotto a lotto, in particolare i kit con livello di specificità ≤ 98,0%, indicano la necessità di un meccanismo regolare di valutazione del kit per ciascun lotto per procurarsi kit appropriati per l’uso previsto.

 

Creatinine ELISA Kit

DLR-Crtn-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Creatinine ELISA Kit

DLR-Crtn-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Androsterone (ADT) ELISA Kit

DLR-ADT-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Androsterone (ADT) ELISA Kit

DLR-ADT-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Androstenediol (AED) ELISA Kit

DLR-AED-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Androstenediol (AED) ELISA Kit

DLR-AED-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Aldosterone (ALD) ELISA Kit

DLR-ALD-Ge-48T DL Develop 48T 681.6 EUR

Aldosterone (ALD) ELISA Kit

DLR-ALD-Ge-96T DL Develop 96T 892.8 EUR

Allopregnanolone (AP) ELISA Kit

DLR-AP-Ge-48T DL Develop 48T 585.6 EUR

Allopregnanolone (AP) ELISA Kit

DLR-AP-Ge-96T DL Develop 96T 759.6 EUR

Androstenedione (ASD) ELISA Kit

DLR-ASD-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Androstenedione (ASD) ELISA Kit

DLR-ASD-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Human Asprosin ELISA Kit

DLR-Asprosin-Hu-48T DL Develop 48T 574.8 EUR

Human Asprosin ELISA Kit

DLR-Asprosin-Hu-96T DL Develop 96T 745.2 EUR

Carnosine (CAR) ELISA Kit

DLR-CAR-Ge-48T DL Develop 48T 585.6 EUR

Carnosine (CAR) ELISA Kit

DLR-CAR-Ge-96T DL Develop 96T 759.6 EUR

Cortisone (Cor) ELISA Kit

DLR-Cor-Ge-48T DL Develop 48T 681.6 EUR

Cortisone (Cor) ELISA Kit

DLR-Cor-Ge-96T DL Develop 96T 892.8 EUR

Corticosterone (Cort) ELISA Kit

DLR-Cort-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Corticosterone (Cort) ELISA Kit

DLR-Cort-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Cortisol (Cor) ELISA Kit

DLR-Cortisol-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Cortisol (Cor) ELISA Kit

DLR-Cortisol-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Dopamine (DA) ELISA Kit

DLR-DA-Ge-48T DL Develop 48T 681.6 EUR

Dopamine (DA) ELISA Kit

DLR-DA-Ge-96T DL Develop 96T 892.8 EUR

Dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit

DLR-DHEA-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit

DLR-DHEA-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit

DLR-DHT-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit

DLR-DHT-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Estrone (E1) ELISA Kit

DLR-E1-Ge-48T DL Develop 48T 585.6 EUR

Estrone (E1) ELISA Kit

DLR-E1-Ge-96T DL Develop 96T 759.6 EUR

Estradiol (E2) ELISA Kit

DLR-E2-Ge-48T DL Develop 48T 519.6 EUR

Estradiol (E2) ELISA Kit

DLR-E2-Ge-96T DL Develop 96T 669.6 EUR

Estriol (E3) ELISA Kit

DLR-E3-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Estriol (E3) ELISA Kit

DLR-E3-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Ethinylestradiol (EE) ELISA Kit

DLR-EE-Ge-48T DL Develop 48T 607.2 EUR

Ethinylestradiol (EE) ELISA Kit

DLR-EE-Ge-96T DL Develop 96T 789.6 EUR

Epinephrine (EPI) ELISA Kit

DLR-EPI-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Epinephrine (EPI) ELISA Kit

DLR-EPI-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR

Epitestosterone (ET) ELISA Kit

DLR-ET-Ge-48T DL Develop 48T 562.8 EUR

Epitestosterone (ET) ELISA Kit

DLR-ET-Ge-96T DL Develop 96T 729.6 EUR
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