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Quanto sono affidabili i kit ELISA Glypican4 disponibili in commercio?

Posted on Dicembre 31, 2021 by Andrea
Obiettivo: Glypican4 è una nuova interessante adipochina, che sembra svolgere un ruolo importante nei processi di sviluppo ed è potenzialmente associata a cambiamenti metabolici nell’obesità e nel diabete mellito di tipo 2. Attualmente, solo pochi studi hanno esaminato glipican4 nel sangue umano, principalmente negli adulti.
Design, pazienti e misurazioni: Lo scopo del nostro studio era di indagare i livelli sierici di glypican4 in bambini e adolescenti magri, sovrappeso e obesi, per svelare una possibile associazione tra siero di glypican4 livelli e parametri di obesità e insulino-resistenza. Al fine di determinare un metodo adatto per indagare i livelli sierici di glypican4, abbiamo convalidato due kit ELISA di glypican4 umano disponibili in commercio, utilizzando campioni di siero e plasma di un paziente obeso, insulino-resistente e di un soggetto di controllo sano, un frammento di proteina glipican4 umano ricombinante e lisato cellulare con sovraespressione di glypican4.
Risultati: Utilizzando il kit ELISA n. 1 non siamo stati in grado di rilevare valori al di sopra del livello di fondo, a parte i valori della curva standard. Il kit ELISA n. 2 inizialmente sembrava adatto per misurare glypican4, ma ulteriori esperimenti di validazione hanno mostrato non linearità delle diluizioni seriali, nessun riconoscimento di un frammento di proteina ricombinante umano glypican4 e non linearità nel recupero del lisato cellulare con sovraespressione di glypican4. Inoltre, si è verificata una notevole diminuzione (circa il 68%) dei valori misurati tra due esperimenti, eseguiti in momenti diversi con aliquote dello stesso campione di siero. Al contrario, ulteriori esperimenti hanno riscontrato che la stabilità del campione non era compromessa.
Conclusioni: Un’ampia valutazione delle prestazioni di due kit ELISA disponibili in commercio ha portato alla conclusione che nessuno di essi è applicabile per la misurazione del glipicano4 nei campioni di sangue umano.

Valutazione di tre kit ELISA disponibili in commercio per la determinazione della cromogranina A

La cromogranina A (CgA) è attualmente il biomarcatore tumorale più prezioso per il lavoro diagnostico, la gestione e il follow-up dei tumori neuroendocrini (NET). Lo scopo del nostro studio era confrontare tre diversi kit CgA ELISA disponibili in commercio e valutarne le prestazioni analitiche e cliniche. La CgA è stata misurata con tre diversi kit ELISA commerciali su sieri avanzati di 40 pazienti: Chromoa R assay (Cis), Hu chromogranin A ELISA (Dia) e Neolisa chromogranin A (Euro).

 

Le prestazioni analitiche e cliniche sono state valutate misurando la precisione, l’area sotto la curva ROC, la sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo e negativo, i coefficienti di correlazione e le analisi di regressione Passing e Bablok. La precisione (CV%) era accettabile per tutti gli ELISA valutati (Cis 10,3%; Dia 9,8%; Euro 14,5%). L’area sotto la curva (AUC) era comparabile tra i tre saggi (Cis 0,693; Dia 0,627; Euro 0,721). La sensibilità variava tra il 41,2% e il 64,7%.

La specificità variava tra il 69,6% e l’82,6%. Il confronto a coppie ha rivelato differenze sistematiche e proporzionali significative quando si confrontano Cis contro Dia (Cis = 25,30 + 1,94 Dia) e Euro contro Dia (Euro = 26,54 + 1,92 Dia). Le prestazioni analitiche e cliniche erano comparabili per i tre ELISA. I risultati CgA ottenuti con diversi ELISA non sono intercambiabili. Abbreviazioni CgA: Cromogranina A; ELISA: saggio di immunoassorbimento enzimatico; IRMA: saggio immunoradiometrico; NET: Tumori neuroendocrini; PPI: inibitori della pompa protonica; RIA: dosaggio radioimmunologico.

 

Sviluppo e applicazione di un kit ELISA per la rilevazione del progesterone del latte nelle vacche da latte

 

Il progesterone (P4) è un ormone gonadico steroideo prodotto principalmente dal corpo luteo e dalla placenta e ha varie funzioni biologiche, in particolare la regolazione riproduttiva. È importante stabilire un saggio immunoassorbente legato all’enzima P4 (ELISA) specifico e sensibile per lo studio dell’attività ovarica e dei disturbi riproduttivi. Pertanto, abbiamo preparato un anticorpo monoclonale (MAb) in un antigene completo (11α-OH-P4-HS-OVA). Sulla base del MAb e del nostro antigene completo precedentemente preparato, è stato sviluppato un ELISA altamente specifico e sensibile.
Nel presente studio è stato descritto un ELISA competitivo per la determinazione di P4 nel latte di vacca da latte. È stato riscontrato che la concentrazione di P4 nei campioni di latte di cinque vacche gravide era significativamente più alta di quella di cinque vacche in estro. Il tasso di diagnosi di gravidanza e non gravidanza in 54 vacche da latte era del 93,3% e del 95,8%, rispettivamente, da 19 a 23 giorni dopo la gravidanza rilevando la concentrazione di P4 nel latte. In sintesi, l’ELISA sviluppato è un potenziale strumento per la ricerca sulla P4 e offre una tecnica alternativa, semplice e rapida per rilevare la P4, in particolare nelle future grandi indagini cliniche sull’identificazione della gravidanza e sui disturbi riproduttivi negli allevamenti lattiero-caseari in Cina.

Valutazione delle prestazioni di kit ELISA commerciali per lo screening dei residui di furazolidone e furaltadone nei pesci.

Il monitoraggio normativo per i residui di farmaci nitrofurani nei prodotti dell’acquacoltura si è in gran parte concentrato su LC-MS/MS. Inoltre, sono necessari metodi di screening facili e ad alto rendimento per i programmi di monitoraggio. Abbiamo valutato le prestazioni dei kit ELISA Ridascreen (R-Biopharm) per i residui di farmaci nitrofurani nel muscolo di pesce, con verifica mediante LC-MS / MS.

I kit erano disponibili per le catene laterali 3-amino-2-ossazolidinone (AOZ) e 3-amino-5-morfolino-metil-2-ossazolidinone (AMOZ) di furazolidone e furaltadone, rispettivamente. Abbiamo trovato una buona ripetibilità in campioni di muscoli fortificati e sostenuti, con RSD che vanno dall’1,8% al 7,6%. I recuperi di AOZ e AMOZ da muscoli fortificati a livelli di 0,5-2 ng/g variavano dal 98% al 114%. È stata dimostrata un’eccellente selettività. I limiti minimi di rilevamento (MDL) per AOZ e AMOZ nel muscolo erano rispettivamente di 0,05 e 0,2 ng/g. I dati ELISA erano altamente correlati con quelli di LC-MS/MS. I risultati di questo studio supportano l’uso di questi kit come test di screening per i residui di nitrofurano nel muscolo del pesce.

Valutazione comparativa dei kit ELISA commerciali per il rilevamento dell’HIV in India.

SFONDO
L’India ospita la terza popolazione con infezione da HIV più alta a livello globale. L’ampiezza della sfida per il rilevamento dell’HIV è enorme. L’ELISA è la tecnica di screening più comunemente usata per l’HIV. C’è sempre un forte bisogno di kit ELISA di buona qualità. Tuttavia, i dati di valutazione della qualità sui kit indiani sono molto limitati rispetto ai kit riconosciuti a livello internazionale. Questo studio mirava a valutare le prestazioni e l’utilità diagnostica di cinque kit ELISA disponibili in commercio che sono frequentemente utilizzati in India.
RISULTATI
I kit ELISA valutati utilizzando un pannello interno di sieri di 100 membri ben caratterizzato hanno rivelato una sensibilità del 100% per tutti i lotti. Tuttavia, è stata osservata una variazione da lotto a lotto in termini di specificità, valore predittivo positivo (PPV) ed efficienza, sebbene non statisticamente significativa (p> 0,05). Per specificità, i kit di 3a generazione (media dal 99,6% al 99,3%) erano comparativamente migliori dei test di 4a generazione (dal 97,2% al 96,9%). Ma i kit di quarta generazione hanno ottenuto risultati molto migliori nella capacità di diagnosi precoce post infezione da HIV nel pannello di sieroconversione commerciale di 25 membri con un margine di almeno 22 giorni e fino a 35 giorni rispetto ai test di terza generazione.
CONCLUSIONI
I kit ELISA commerciali con una sensibilità del 100% sembrano appropriati per lo screening dell’HIV. La capacità di diagnosi precoce dopo l’infezione da HIV favorisce l’uso di kit di quarta generazione per garantire sangue libero da HIV per la trasfusione. Le variazioni da lotto a lotto, in particolare i kit con livello di specificità ≤ 98,0%, indicano la necessità di un meccanismo regolare di valutazione del kit per ciascun lotto per procurarsi kit appropriati per l’uso previsto.

 

UHPLC Method Develop Kit 1.8um

CHR5148 Scientific Laboratory Supplies PK5 4311.6 EUR

Tissue and Cell Extraction and Purification

EP10011 Neuromics 100 Tests 763.2 EUR

p5 Ligand for Dnak and and DnaJ

5-01680 CHI Scientific 4 x 5mg Ask for price

Linsmaier and Skoog, With macro- and micronutrients

CP021-010 GenDepot 10X1L 121.2 EUR

Linsmaier and Skoog, With macro- and micronutrients

CP021-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Murashige and Skoog, With Vitamins and Glycine

CP031-010 GenDepot 10X1L 118.8 EUR

Murashige and Skoog, With Vitamins and Glycine

CP031-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Acrolein and Acrylonitrile in Methanol P and T

603-XM Scientific Laboratory Supplies 1ML 32.4 EUR

p5 Ligand for Dnak and and DnaJ Peptide

20-abx266082 Abbexa
  • 493.20 EUR
  • 794.40 EUR
  • 376.80 EUR
  • 10 mg
  • 25 mg
  • 5 mg

Testo 175 And 176 temperature And humidity probe

THE2590 Scientific Laboratory Supplies EACH 353.82 EUR

AnD External Display

BAL2572 Scientific Laboratory Supplies EACH 349.2 EUR

Murashige and Skoog

CP023-010 GenDepot 10X1L 118.8 EUR

Murashige and Skoog

CP023-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Nitsch and Nitsch

CP036-010 GenDepot 10X1L 121.2 EUR

Nitsch and Nitsch

CP036-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Shenk and Hildebrandt

CP038-010 GenDepot 10X1L 121.2 EUR

Shenk and Hildebrandt

CP038-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Recombinant Human AND

P0015 FN Test 100ug 626.83 EUR

High density larynx and pharynx squamous cell carcinoma and larynx and pharynx tissue array

LP208 TissueArray each 546 EUR

Mouse Ariway PrimaCell3: Normal Bronchial and and Tracheal Fibroblasts

2-82003 CHI Scientific 1 Kit Ask for price

Rat Ariway PrimaCell3: Normal Bronchial and and Tracheal Fibroblasts

2-82503 CHI Scientific 1 Kit Ask for price

Human Airway PrimaCell4: Normal Bronchial and and Tracheal Fibroblasts

2-96004 CHI Scientific 1 Kit Ask for price

SS grid for size 55 and 75 and HCP50

CHA4020 Scientific Laboratory Supplies EACH 141.6 EUR

Murashige and Skoog, 1/2 Micronutrients and 1/2 Iron

CP024-010 GenDepot 10X1L 118.8 EUR

Murashige and Skoog, 1/2 Micronutrients and 1/2 Iron

CP024-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Murashige and Skoog, With Vitamins, Glycine, and 30g/L Sucrose

CP032-010 GenDepot 10X1L 121.2 EUR

Murashige and Skoog, With Vitamins, Glycine, and 30g/L Sucrose

CP032-500 GenDepot 50L 151.2 EUR

Cervical cancer and normal tissue array with TNM and grade

CR804 TissueArray each 306 EUR

Liver cancer and normal tissue array with TNM and grade

LV807 TissueArray each 306 EUR

Accessory and USB Memory Stick. Calibration Standard and Certificate Included.

SPE5050 Scientific Laboratory Supplies EACH 7502.4 EUR

Phosphoserine and Phosphothreonine antibody

70R-10686 Fitzgerald 1 ml 447.6 EUR

Blunting and Ligation Kit

BS243 Bio Basic 10Preps 122.64 EUR

Protease, Phosphatase and PMSF

abx090639-1ml Abbexa 1 ml 276 EUR

AnD Balance 3000x0.1g EK3000i

BAL2558 Scientific Laboratory Supplies EACH 472.8 EUR

AnD Multi Function Printer

BAL2800 Scientific Laboratory Supplies EACH 927.6 EUR

Multi-Compressor and Tray

CHR5466 Scientific Laboratory Supplies EACH 408 EUR

Haloethers and Phthalates Mix

CLPS-C Scientific Laboratory Supplies 1ML 52.8 EUR

Mortar and Pestle 51mm

CR211211300 Scientific Laboratory Supplies EACH 14.4 EUR

RFPL2 and RFPL3 Antibody

abx433225-200ul Abbexa 200 ul 343.2 EUR

SUR1 and SUR2B Antibody

abx440192-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR
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