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Dispositivo microfluidico rapido completamente integrato tradotto dal convenzionale kit ELISA a 96 pozzetti

Posted on Dicembre 31, 2021 by Andrea
In questo lavoro, è stato implementato un dispositivo microfluidico attivo completamente integrato che trasforma un kit convenzionale da 96 pozzetti in un dispositivo di test point-of-care (POCT) per migliorare le prestazioni del tradizionale test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Il test ELISA con il metodo convenzionale spesso richiede la raccolta di 96 campioni per il suo funzionamento e un tempo di incubazione più lungo da ore a tutta la notte, mentre il nostro dispositivo proposto esegue l’ELISA individuando immediatamente un 96 pozzetto per i singoli pazienti.
Per fare ciò, nel dispositivo sono state integrate una pompa e una valvola su chip programmabili e monouso per il controllo e l’attuazione precisi dei reagenti microfluidici, che regolavano un tempo di reazione e un volume di reagente per supportare i protocolli ottimizzati di ELISA. Grazie alla pompa e alla valvola su chip, l’ELISA può essere eseguito con un consumo ridotto di reagenti e un minor tempo di analisi, che sono fondamentali per l’ELISA convenzionale utilizzando micropiastre a 96 pozzetti.
Per dimostrare un rilevamento altamente sensibile e un funzionamento facile da usare, questo dispositivo non convenzionale è stato applicato con successo per la quantificazione della troponina cardiaca I (cTnI) di 4,88 pg/mL utilizzando un volume di campione minimo di 30 withL con un tempo di analisi più breve di 15 min per ogni passaggio ELISA. Il limite di rilevamento (LOD) così ottenuto è stato notevolmente migliorato rispetto alla piattaforma convenzionale a 96 pozzetti.

Analisi del contenuto di glutine in vari prodotti alimentari utilizzando diversi tipi di kit di test ELISA

Il glutine è una proteina insolubile prodotta quando gluteline e prolamine, che si trovano in cereali come grano, orzo e avena, si combinano per formare un film sottile ed elastico. Questo glutine alimentare può causare una grave contrazione della mucosa intestinale in alcune persone, impedendo l’assorbimento dei nutrienti. Questa condizione, chiamata celiachia (MC), colpisce circa l’1% della popolazione mondiale. L’unico trattamento attuale per i pazienti con MC e malattie simili è evitare il glutine per tutta la vita.
Per analizzare il contenuto di glutine negli alimenti, vengono attualmente utilizzati vari test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). In questo studio, il contenuto di glutine in vari prodotti alimentari è stato analizzato utilizzando diversi tipi di kit di test ELISA. Per gli alimenti senza glutine, tre diversi kit di test ELISA hanno prodotto per lo più valori al di sotto del limite di rilevabilità.
Tuttavia, il glutine è stato rilevato a 24,0-40,2 g/kg nel pane, 6,5-72,6 g/kg nei noodles e 23,0-86,9 g/kg in diversi campioni di alimenti in polvere. Una differenza significativa ( p & lt; 0,05) nel contenuto di glutine è stata osservata per questi prodotti alimentari contenenti glutine. I problemi di riproducibilità suggeriscono che è necessario utilizzare diversi kit ELISA per l’accurata rilevazione e quantificazione del glutine in vari prodotti alimentari piuttosto che utilizzare un kit ELISA.

Sviluppo di un kit ELISA sensibile e affidabile di aptoglobina urinaria per prevedere il progresso della malattia renale diabetica

 

Obiettivi: L’aptoglobina urinaria (UHp) è un potenziale biomarcatore per predire la progressione della malattia renale diabetica (DKD) per rimediare ai difetti dell’albumina urinaria attualmente utilizzata. L’applicazione clinica dell’UHp è tuttavia limitata a causa del livello estremamente basso nelle urine. Questo studio mira a stabilire un kit ELISA specifico per rilevare l’UHp nei campioni di urina di pazienti con diabete e DKD.
Materiali e metodi: Sono stati generati anticorpi umani di aptoglobina supersensibili per lo sviluppo del kit ELISA e sono state valutate la sensibilità, la specificità e la riproducibilità del kit. Questo kit è stato utilizzato per rilevare l’UHp in 246 individui sani e 83 pazienti con diabete di tipo 2 (T2D). È stata analizzata l’interferenza dei genotipi di aptoglobina nel sangue sulla misurazione dell’UHp.
Risultati: Il kit UHp ELISA aveva una curva standard che andava da 5 a 200 ng/ml. Il limite di rilevabilità basso era 0,11 ng/ml. I coefficienti di variazione intra e inter-dosaggio erano rispettivamente del 5,5% e dell’8,3%. Il kit ha mostrato un’elevata precisione con un tasso di recupero medio del 100,9% e una linearità R 2 = 0,999. Il range di riferimento dell’UHp era 0-42,3 ng/g di creatinina (0-Q95) in individui sani.
Il livello di UHp era significativamente più alto nei pazienti con diabete di tipo 2 con microalbuminuria e macroalbuminuria rispetto a quello con diabete di tipo 2 senza microalbuminuria (p & lt; 0,01). La concentrazione di UHp misurata da questo kit non è stata influenzata dai genotipi di aptoglobina.
Conclusioni: abbiamo generato un kit ELISA per rilevare con precisione i livelli di UHp, che è potenzialmente un biomarcatore affidabile di DKD. Questo articolo è protetto da copyright. Tutti i diritti riservati.

Valutazione di un nuovo kit di test ELISA IgG Strongyloides

.Contesto: Strongyloides stercoralis pone una significativa sfida clinica e di salute pubblica non solo nelle regioni endemiche ma anche nelle regioni non endemiche associate ai viaggi. L’esclusione di questa infezione è essenziale negli ospiti immunocompromessi data l’elevata probabilità di riattivazione e mortalità.

Metodi: In questo studio abbiamo confrontato un test ELISA basato su due antigeni ricombinanti negli Stati Uniti con un test sierologico di riferimento altamente sensibile e specifico.
Risultati & amp; Conclusione: c’era un accordo del 100% tra i due metodi. I test ELISA basati sugli antigeni ricombinanti Strongyloides stercoralis hanno il potenziale per migliorare la specificità. Ulteriori studi sono garantiti.

 

Evaluation of ELISA kits for the screening of four nitrofuran metabolites in aquaculture products according to the European guideline for the validation of screening methods

 

The administration of nitrofurans to livestock to treat or prevent animal diseases has been banned in the EU for the production of food of animal origin. The corresponding marker residues are tissue-related metabolites AMOZ, AHD, SEM, and AOZ. The MRPL (minimum required performance limit)/RPA (Reference point for action) was set at 1 µg kg-1 in the EU. Thus, all the laboratories involved in the control of nitrofuran metabolites must detect at least at this analytical limit of performance.

The objectives of the work reported here were to evaluate the performance of ELISA kits from two different manufacturers (R-Biopharm, Germany; Europroxima, the Netherlands) for the individual screening of the four nitrofuran metabolites (AOZ, AMOZ; AHD; and SEM) in aquaculture products (fish, shrimps), and then to validate the kits according to the European Decision EC/2002/657 and to the European guideline for the validation of screening methods.

The false positive rates were below 9 % for the kits from both manufacturers. The detection capabilities CCβ determined were all below the current RPA (1 µg/kg). However, regarding the updated RPA at 0.5 µg/kg that shall apply in 2022, the AMOZ and SEM kits from R-Biopharm and the SEM kit from Europroxima will not be able to reach it.

Sealed Vials Calibration Kits

2659505 Scientific Laboratory Supplies EACH 814.6 EUR

Carcass Sponge Sampling Kits

SWA1038 Scientific Laboratory Supplies PK95 332.88 EUR

HISTAR DETECTION SYSTEM Kits (OKSA11259)

OKSA11259 Aviva Systems Biology 50 Tests 678 EUR

HISTAR DETECTION SYSTEM Kits (OKSA11260)

OKSA11260 Aviva Systems Biology 150 Tests 1602 EUR

HISTAR DETECTION SYSTEM Kits (OKSA11261)

OKSA11261 Aviva Systems Biology 500 Tests 2422.8 EUR

MitoPT™ TMRE & TMRM Kits

KF17358 Neuromics 500 Test 574.8 EUR

MitoPT™ TMRE & TMRM Kits

KF17359 Neuromics 500 Test 574.8 EUR

Rat Neural Stem Cell Kits

PC37123 Neuromics 1 X 10(6) *minimum order 6 vials* 1148.4 EUR

Nori® Porcine 3-Plex ELISA Kits-Interferons

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