C’è un urgente bisogno di una conta CD4 poco costosa per il monitoraggio della malattia da HIV.

1. La conta dei CD4 è irraggiungibile nelle regioni con risorse limitate a causa dei vincoli di tempo e temperatura, del progresso tecnico e del costo dei reagenti, in particolare degli anticorpi monoclonali per la misurazione dei CD4 sui globuli, l’unico metodo attualmente accettabile. Una strategia comune di laboratorio che consente di risparmiare tempo e denaro è calcolare, non misurare, alcuni valori del sangue. Ad esempio, i livelli di LDL vengono calcolati utilizzando i livelli misurati di colesterolo totale, HDL e trigliceridi.
2. Pertanto, l’identificazione di correlati privi di cellule che regolano direttamente la conta dei linfociti T CD4 (+) può fornire un metodo accurato per calcolare la conta dei CD4 a causa dell’importanza fisiologica dei correlati. Il numero di cellule staminali che entrano nel flusso sanguigno per diventare cellule T CD4 (+) circolanti è determinato dalla chemochina CXCL12 e dal suo recettore CXCR4 per il loro effetto sulla locomozione. Il processo di migrazione delle cellule staminali nel sangue è inoltre regolato dall’elastasi leucocitaria umana (HLE (CS)) e da un inibitore attivo dell’α (1) proteinasi reattiva con HLE (CS) (α (1) PI, α (1) antitripsina , Serpino A1) . Nella malattia da HIV-1 α (1), il PI è inattivato a causa dei processi patologici. Nelle prime categorie di malattie HIV-1 asintomatiche, l’α (1) PI attivo era inferiore alla norma nel 100% dei pazienti con HIV-1 non trattati (mediana = 12 μM,
3. Questo modello è attribuito all’inattivazione immunitaria, non alla sintesi insufficiente, all’inattivazione proteolitica o all’ossigenazione. Abbiamo osservato che nelle persone con HIV-1 con> 220 cellule CD4 / μl, il numero di cellule CD4 era correlato al livello di α attivo(1) PI (r (2) = 0,93, p <0,0001, n = 26) e inattivo α (1) PI (r (2) = 0,91, p <0,0001, n = 26). La somministrazione di α (1) PI a individui infetti e non infetti da HIV-1 ha provocato un drammatico aumento della conta delle cellule CD4, suggerendo che α (1) PI partecipa alla regolazione delle cellule T CD4 (+) nel sangue. Dopo la stimolazione, tutta la saliva contiene sufficiente essudato sierico (plasma contenente materiale proteico che passa attraverso le pareti dei vasi sanguigni nella saliva) per consentire la misurazione dell’α (1) PI attivo e la correlazione di questa misurazione è la prova che questo è un metodo di calcolo accurato CD4 conta. In breve, i sialoghi, come la gomma da masticare o l’acido citrico, stimolano l’essudazione del siero nella saliva di tutta la bocca. Dopo la stimolazione dell’essudato sierico, l’attività α (1) PI del siero nella saliva viene misurata dalla sua capacità di inibire l’attività dell’elastasi.
4. L’elastasi pancreatica suina (PPE) è una fonte economica di elastasi prontamente disponibile. Il PPE si lega all’α (1) PI per formare un complesso uno-a-uno che impedisce al PPE di scindere i suoi substrati specifici, uno dei quali è il peptide colorimetrico  , succinyl-L-Ala-L-Ala-L-Ala-p- nitroanilide (SA (3) ND). L’incubazione della saliva con una concentrazione satura di PPE per 10 minuti a temperatura ambiente consente il legame dei PPE a tutti gli α (1) PI attivi nella saliva. L’inibizione risultante di PPE da parte dell’attivo α (1) PI può essere misurata aggiungendo il substrato PPE SA (3) NA.
5. Sebbene la conta dei CD4 sia misurata come volume sanguigno (cellule CD4 / μL), la concentrazione di α (1) PI nella saliva è correlata alla concentrazione sierica nella saliva e non al volume della saliva, poiché il volume della saliva può variare considerevolmente durante il giorno e un persona alle persone. Tuttavia, praticamente tutte le proteine ​​della saliva derivano dal siero e il contenuto proteico della saliva è misurabile. Pertanto, α (1) PI salivare attivo viene calcolato come rapporto tra il contenuto proteico salivare e viene indicato come rapporto α (1) PI. I risultati qui presentati mostrano che l’indice α (1) PI fornisce un metodo fisiologico accurato e preciso per calcolare il conteggio dei CD4.

Test rapido della saliva per quantificare il reservoir subclinico del parassita infettivo della malaria.

Con il COVID-19 in aumento, l’insufficiente capacità di test diagnostici minaccia di controllare la diffusione della malattia. A causa delle impostazioni centralizzate e dei lunghi tempi di consegna, la reazione a catena della polimerasi della trascrizione inversa in tempo reale (RT-PCR in tempo reale), il gold standard per il rilevamento dei virus, non è riuscita a riflettere tempestivamente lo status quo dell’epidemia durante un’epidemia urgente.

Pertanto,  è necessario uno strumento di screening rapido per aiutare a contenere la diffusione del COVID-19 nei paesi in cui i vaccini non sono ampiamente utilizzati. In questo articolo, proponiamo  un test dell’antigene COVID-19 basato sulla saliva utilizzando un biosensore elettrico basato su un transistor a effetto di campo a doppio strato (EDL) (BioFET). Il rilevamento della proteina SARS-CoV-2 del nucleocapside (N) è convalidato con limiti di rilevamento (LoD) di 0,34 ng/ml (7,44 pM) e 0,14 ng/ml (2,96 pM) in 1x PBS e saliva artificiale.

La specificità viene verificata rispetto a tipi di antigeni che mostrano una bassa reattività crociata tra MERS-CoV, influenza A e influenza B.

• Questo sistema portatile è dotato di comunicazione Bluetooth e interfacce user-friendly che sono completamente compatibili con la salute digitale, portando in pratica a riparazioni in loco, gestione efficace e una risposta proattiva da parte di medici e operatori sanitari.
• SARS-CoV-2 infetta diverse specie animali e le varianti di preoccupazione SARS-CoV-2 (VOC) possono anche mostrare (come negli esseri umani) tassi aumentati di trasmissione interspecifica e intraspecifica. Abbiamo correlato la sensibilità dei dati del test rapido dell’antigene SARS-CoV-2 (RAT) con gli equivalenti del genoma dell’RNA virale analizzati dalla reazione a catena della polimerasi della trascrittasi inversa in tempo reale (RT-PCR)  .
• Inoltre, abbiamo verificato la loro idoneità alla sperimentazione animale valutando gli effetti della saliva e dei COV. I virus fino a 2 log (numero di copie dell’RNA) al di sotto dell’ipotetica soglia di infettività SARS-CoV-2 sono stati rilevati dalla maggior parte dei RAT analizzati.
• Tuttavia, mentre la saliva di varie specie animali generalmente non ha influenzato negativamente la sensibilità analitica dei RAT, il rilevamento di VOC B.1.1.7 e B.1.351 è stato inferiore in alcuni RAT rispetto ai virus non COV.
• L’identificazione e l’isolamento rapidi delle persone infette da SARS-CoV-2 sono fondamentali. Studi recenti hanno dimostrato che la RT-PCR da saliva autodonata è un’alternativa adatta al tampone nasofaringeo. Lo svantaggio della RT-PCR è che ci vuole molto tempo per ottenere un risultato, il che può essere problematico.
• Per affrontare questo problema, questo studio ha valutato un test rapido dell’antigene CE certificato per rilevare SARS-CoV-2 utilizzando la saliva (cassetta per il test dell’antigene COVID-19 (Colloidal Gold Sensitive).
• È stata dimostrata una sensibilità complessiva del test Rapid Saliva Antigen del 44,4% e una specificità del 100% rispetto ai risultati della RT-PCR del gargarismo come gold standard. I dati suggeriscono che i test antigenici rapidi basati sulla saliva per il rilevamento di SARS-CoV-2 non sono un sostituto affidabile della RT-PCR

Gran parte della trasmissione in corso del parassita della malaria è attribuita a infezioni subcliniche a bassa densità che non sono prontamente rilevate dai test diagnostici rapidi (RDT) o dalla microscopia disponibili.

Il trasferimento dei gametociti del Plasmodium falciparum   è subclinico, ma il serbatoio dei parassiti sono quelli con gametocitemia che portano all’infezione da zanzara e alla trasmissione locale. Il rilevamento e la quantificazione efficaci di questi vettori possono aiutare nello sviluppo di strategie di eliminazione della malaria. Tuttavia, non esistono test RDT in place of need (PON) per la rilevazione dei gametociti, tanto meno quelli che possono eseguire un campionamento non invasivo della saliva al di fuori del contesto clinico.