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Un kit ELISA per sandwich alla leptina inutilizzabile per animali domestici

Posted on Dicembre 30, 2021 by Andrea

Viene segnalato un caso di errore del metodo di dosaggio ormonale. In questa rivista Chronobiology International, sono apparsi due articoli in cui un metodo ELISA per siero o plasma umano è stato utilizzato rispettivamente per siero di sangue di cavallo e di pecora. Dai nostri test, è risultato che tale metodo non funziona affatto per equini, pecore e altre specie animali.

L’uso di kit di test ormonali commerciali per specie eterologhe richiede sempre un’attenta procedura di validazione. In primo luogo, la stessa molecola ormonale di specie diverse non potrebbe condividere abbastanza omologia per essere riconosciuta e reagire con gli anticorpi utilizzati nel metodo. Inoltre, anche con una completa sovrapposizione delle molecole, devono essere considerate le possibili interferenze di altri componenti del campione (effetto matrice).

 

Technical viability of the YF MAC-HD ELISA kit for use in yellow fever-endemic regions

Yellow fever (YF), an arboviral disease, affects an estimated 200,000 people and causes 30,000 deaths per year and recently has caused major epidemics in Africa and South America. Timely and accurate diagnosis of YF is critical for managing outbreaks and implementing vaccination campaigns. A YF immunoglobulin M (IgM) antibody-capture (MAC) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit, the YF MAC-HD, was successfully introduced starting in 2018 to laboratories in Africa and South America.
The YF MAC-HD kit can be performed in 3.5 hours, test up to 24 samples, and includes all reagents necessary to perform the test, except for water used to dilute wash buffer. In 2018 and 2019, a total of 56 laboratory personnel from 39 countries in Africa and South America were trained to use the kit during workshops, followed by take-home YF IgM proficiency testing (PT) exercises. Participants received either a 10- or 20-sample YF PT panel and performed testing using the YF MAC-HD kit. All countries obtained 90% or higher correct results. These results verified the technical viability and transferability of YF MAC-HD kit use for laboratories in YF-endemic countries.

Valutazione del glutine nelle birre: confronto tra diversi kit ELISA commerciali e valutazione dell’analisi NIR come tecnica complementare

Tradizionalmente, le birre sono prodotte con cereali contenenti glutine. È fondamentale disporre di metodologie analitiche rapide che permettano il controllo del contenuto di glutine delle birre per i consumatori celiaci. Valutiamo il contenuto di glutine in 65 birre etichettate convenzionali e 41 senza glutine commercializzate in Europa e confrontiamo i risultati in un sottogruppo di 71 birre con tre kit ELISA. Questa ricerca consente di raccogliere informazioni sulla potenziale utilità complementare dell’analisi NIR applicata all’analisi del glutine delle birre senza glutine in termini di risparmio di tempo.

I risultati ottenuti con la tecnica ELISA hanno identificato la R5 competitiva come la più sensibile nel rilevare le prolamine, suscitando un numero maggiore di birre contenenti glutine superiore a 20 mg/kg. Il contenuto di glutine nelle birre convenzionali testate è aumentato con la presenza del frumento come materia prima e con l’utilizzo di lieviti tipo ale. Utilizzando la R5 competitiva, 3 delle 41 birre etichettate senza glutine sembravano contenere glutine sopra i 20 mg/kg e, al contrario, 15 su 65 delle birre convenzionali mostravano un contenuto di glutine inferiore a questa soglia. Secondo i nostri approcci, il NIR non ha ottenuto una correlazione adeguata con i risultati ELISA, né per la quantificazione del glutine né per la discriminazione, e quindi non può essere proposto come tecnica complementare.

 

Evaluation of Loopamp Leishmania Detection Kit and Leishmania Antigen ELISA for Post-Elimination Detection and Management of Visceral Leishmaniasis in Bangladesh

 

With reduced prevalence of visceral leishmaniasis (VL) in the Indian subcontinent (ISC), direct and field deployable diagnostic tests are needed to implement an effective diagnostic and surveillance algorithm for post-elimination VL control. In this regard, here we investigated the diagnostic efficacies of a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay (Loopamp™ Leishmania Detection Kit, Eiken Chemical CO., Ltd, Japan), a real-time quantitative PCR assay (qPCR) and the Leishmania antigen ELISA (CLIN-TECH, UK) with different sampling techniques and evaluated their prospect to incorporate into post-elimination VL control strategies.

Eighty clinically and rK39 rapid diagnostic test confirmed VL cases and 80 endemic healthy controls were enrolled in the study. Peripheral blood and dried blood spots (DBS) were collected from all the participants at the time of diagnosis. DNA was extracted from whole blood (WB) and DBS via silica columns (QIAGEN) and boil & spin (B&S) methods and tested with qPCR and Loopamp. Urine was collected from all participants at the time of diagnosis and was directly subjected to the Leishmania antigen ELISA.

41 patients were followed up and urine samples were collected at day 30 and day 180 after treatment and ELISA was performed. The sensitivities of the Loopamp-WB(B&S) and Loopamp-WB(QIA) were 96.2% (95% CI 89·43-99·22) and 95% (95% CI 87·69-98·62) respectively. The sensitivity of Loopamp-DBS(QIA) was 85% (95% CI 75·26- 92·00). The sensitivities of the qPCR-WB(QIA) and qPCR-DBS(QIA) were 93.8% (95% CI 86·01-97·94) and 72.5% (95% CI 61·38-81·90) respectively.

The specificity of all molecular assays was 100%. The sensitivity and specificity of the Leishmania antigen ELISA were 97.5% (95% CI 91·47-99·70) and 91.95% (95% CI 84·12-96·70) respectively. The Leishmania antigen ELISA depicted clinical cure at day 180 in all the followed-up cases. Efficacy and sustainability identify the Loopamp-WB(B&S) and the Leishmania antigen ELISA as promising and minimally invasive VL diagnostic tools to support VL diagnostic and surveillance activities respectively in the post-elimination era.

 

 

Determinazione dell’aflatossina M1 nel latte crudo utilizzando un metodo HPLC-FL in confronto con l’applicazione di kit ELISA commerciali in campioni di latte crudo provenienti da varie regioni della Grecia

 

L’aflatossina M1 altamente tossica (AFM1) viene spesso rilevata nel latte utilizzando un saggio immunoenzimatico (ELISA) a scopo di screening, mentre la cromatografia liquida ad alte prestazioni con rivelatore a fluorescenza (HPLC-FL) è il metodo di riferimento utilizzato per la conferma .. Lo scopo del presente studio era il confronto tra tre kit ELISA disponibili in commercio e un metodo HPLC-FL di nuova concezione per la determinazione dell’AFM1 nei campioni di latte. Il metodo HPLC-FL sviluppato è stato convalidato per AFM1 e Aflatossina M2 (AFM2), determinando l’accuratezza, la precisione, la linearità, il limite di decisione e la capacità di rilevamento con risultati abbastanza buoni.

Anche tutti e tre i kit ELISA sono stati convalidati e hanno mostrato prestazioni altrettanto buone con tassi di recupero elevati. Inoltre, i valori del limite di rilevamento (LOD) e del limite di quantificazione (LOQ) sono risultati significativamente inferiori al limite massimo di residui (MRL) (50 ng kg -1 ). Dopo la valutazione di tutti e tre i kit commerciali, è stato utilizzato il kit ELISA con le prestazioni ottimali insieme al metodo HPLC per la determinazione di AFM1 in campioni di latte crudo vaccino, caprino e ovino (396) ottenuti da produttori in diverse regioni della Grecia. La valutazione di entrambi i metodi ha mostrato che questo kit ELISA può essere considerato un metodo alternativo più veloce e altrettanto affidabile all’HPLC nell’analisi di routine per la determinazione di AFM1 nel latte.

Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit

LF-EK60047 Abfrontier 1×96T 679 EUR

Oxycodone ELISA

EK7130 BosterBio 96wells/kit 478 EUR

SAM ELISA

IK00201 Arthus 96 tests 600 EUR

SAH ELISA

IK00301 Arthus 96 tests 990 EUR

Amphiphysin ELISA

LF-EK0189 Abfrontier 1×96T 603 EUR

Human Progesterone(P) ELISA Kit (Competitive ELISA)

EK7004 BosterBio 96wells/kit, with removable strips. 478 EUR

Human Testosterone(T) ELISA Kit (Competitive ELISA)

EK7005 BosterBio 96wells/kit, with removable strips. 478 EUR

Human Estrodial (E2) ELISA Kit (Competitive ELISA)

EK7049 BosterBio 96wells/kit, with removable strips. 478 EUR

Chicken Tissue KXctor,IF ELISA KIT ELISA

QY-E80098 Qayee Biotechnology 96T 426 EUR

AGRN ELISA Kit| Rat Agrin ELISA Kit

EF017533 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

ANG ELISA Kit| Rat Angiogenin ELISA Kit

EF017540 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

AR ELISA Kit| Rat Amphiregulin ELISA Kit

EF017545 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

Arg ELISA Kit| Rat Arginase ELISA Kit

EF017546 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

BK ELISA Kit| Rat Bradykinin ELISA Kit

EF017564 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CALU ELISA Kit| Rat Calumenin ELISA Kit

EF017589 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CAM ELISA Kit| Rat Calmodulin ELISA Kit

EF017590 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CAN ELISA Kit| Rat Calcineurin ELISA Kit

EF017592 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CHEM ELISA Kit| Rat Chemerin ELISA Kit

EF017625 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CNX ELISA Kit| Rat Calnexin ELISA Kit

EF017638 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

GHRL ELISA Kit| Rat Ghrelin ELISA Kit

EF017639 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CP ELISA Kit| Rat Ceruloplasmin ELISA Kit

EF017646 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CR ELISA Kit| Rat Calretinin ELISA Kit

EF017648 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

Cr ELISA Kit| Rat Creatinine ELISA Kit

EF017649 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CRT ELISA Kit| Rat Calreticulin ELISA Kit

EF017651 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CT ELISA Kit| Rat Calcitonin ELISA Kit

EF017652 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

CVL ELISA Kit| Rat Cytovillin ELISA Kit

EF017662 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

DCN ELISA Kit| Rat Decorin ELISA Kit

EF017682 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

Des ELISA Kit| Rat Desmin ELISA Kit

EF017683 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

DHEA ELISA Kit| Rat Dehydroepiandrosterone ELISA Kit

EF017684 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

DMD ELISA Kit| Rat Dystrophin ELISA Kit

EF017690 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

DPD ELISA Kit| Rat Deoxypyridinoline ELISA Kit

EF017691 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

ES ELISA Kit| Rat Endostatin ELISA Kit

EF017711 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

FE ELISA Kit| Rat Ferritin ELISA Kit

EF017722 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

FMOD ELISA Kit| Rat Fibromodulin ELISA Kit

EF017731 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

GS ELISA Kit| Rat Gelsolin ELISA Kit

EF017784 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

Hepc ELISA Kit| Rat Hepcidin ELISA Kit

EF017796 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

HK ELISA Kit| Rat Hexokinase ELISA Kit

EF017797 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

HPA ELISA Kit| Rat Heparanase ELISA Kit

EF017801 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

HPX ELISA Kit| Rat Hemopexin ELISA Kit

EF017804 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

INS ELISA Kit| Rat Insulin ELISA Kit

EF017855 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR
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